重组蛋白究竟是什么？
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- 发布时间：2021-12-15 10:14
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重组蛋白的产生是应用重组DNA或RNA技术获得的蛋白质。重组蛋白的体外生产主要包括四大系统:原核蛋白表达、哺乳动物细胞蛋白表达、酵母蛋白表达和昆虫细胞蛋白表达。
重组蛋白究竟是什么？
重组蛋白的产生是应用重组DNA或RNA技术获得的蛋白质。重组蛋白的体外生产主要包括四大系统:原核蛋白表达、哺乳动物细胞蛋白表达、酵母蛋白表达和昆虫细胞蛋白表达。
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重组蛋白的产生是应用重组DNA或RNA技术获得的蛋白质。重组蛋白的体外生产主要包括四大系统:原核蛋白表达、哺乳动物细胞蛋白表达、酵母蛋白表达和昆虫细胞蛋白表达。
重组蛋白获得途径:
重组蛋白需要通过表达系统制备，可以通过体外法和体内法获得。这两种方法的前提是应用基因重组技术，获得与可翻译成目的蛋白的基因片段相连的重组载体，然后将其转移到可表达目的蛋白的宿主细胞中表达特定的重组蛋白分子。
体外生产重组蛋白主要包括四大系统:原核蛋白表达(常用的大肠杆菌蛋白表达)、哺乳动物细胞蛋白表达(常用细胞CHO、HEK293)、真核表达系统(酵母)和昆虫细胞蛋白表达。合适的表达系统的选择取决于重组蛋白的特性、重组蛋白的预期应用以及系统是否能产生足够的蛋白质。根据其下游应用选择合适的蛋白质表达系统，提高表达成功率。
重组蛋白表达系统:
(1)目前应用广泛的表达系统有三种，即大肠杆菌表达系统、酵母表达系统和CHO细胞表达系统。其中，大肠杆菌是常用的表达重组蛋白的宿主菌，已被应用于生产许多具有重要药用价值的蛋白质。
大肠杆菌表达系统具有生长速度快、培养成本低、遗传背景清晰、易于实现高密度培养等优点。大肠杆菌DH5α为突变株，主要表现为对外来DNA缺乏免疫力。大肠杆菌DH5α是基因工程中常用的宿主菌之一。与正常菌株相比，它缺乏一定的免疫机制。
(2)不同的表达系统和培养方法显著影响下游加工过程。靶蛋白表达是否形成包涵体、靶蛋白表达的位置(胞内、胞内、周质间隙和胞外)和蛋白表达量都取决于所选择的表达系统。
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