液相色谱柱该如何选择
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- 发布时间:2021-07-07 11:04
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可以说色谱柱是色谱分析过程中比较重要的部分。根据自己要分析的样品选择合适的液相色谱柱,需要考虑不同参数的影响,如粒度、酸度、碱度、极性和分子量等。即使是液相色谱柱也分为正相、反相、C18柱、亲水性色谱柱等多种类型。只有了解了影响分析柱性能的因素,才能结合目标分析物的性质、需要达到的分析效果以及实验室条件,选择合适的色谱柱。
液相色谱柱该如何选择
可以说色谱柱是色谱分析过程中比较重要的部分。根据自己要分析的样品选择合适的液相色谱柱,需要考虑不同参数的影响,如粒度、酸度、碱度、极性和分子量等。即使是液相色谱柱也分为正相、反相、C18柱、亲水性色谱柱等多种类型。只有了解了影响分析柱性能的因素,才能结合目标分析物的性质、需要达到的分析效果以及实验室条件,选择合适的色谱柱。
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可以说色谱柱是色谱分析过程中比较重要的部分。根据自己要分析的样品选择合适的液相色谱柱,需要考虑不同参数的影响,如粒度、酸度、碱度、极性和分子量等。即使是液相色谱柱也分为正相、反相、C18柱、亲水性色谱柱等多种类型。只有了解了影响分析柱性能的因素,才能结合目标分析物的性质、需要达到的分析效果以及实验室条件,选择合适的色谱柱。
在设置选择样品分析的HPLC方法时,首先要根据化合物的分子量和极性选择合适的分离模式,在合适的分离模式下选择合适的色谱柱和流动相,大多数涉及色谱分析的化合物样品都可以使用反相分离模式。
影响反相键合相色谱柱性能的因素有哪些呢?
1. 硅胶纯度
硅胶纯度对峰形有很大液相。硅胶中的杂质和残留的金属离子会影响样品的峰形。如果硅胶表面的金属含量高,会影响峰形。碱性化合物的峰形容易拖尾。色谱柱采用全覆盖键合硅胶作为填料,具有优异的稳定性、重复性、高选择性和高分辨率。
2. 颗粒形状和尺寸
球形颗粒柱效高,重现性好,柱床结构均匀;不规则颗粒柱床结构不规则,流动相线速度不规则均匀,容易形成谱带增宽;平均粒径,粒径越小,柱效越高,柱压越高。粒径分布越宽,柱效越低,压力越大,色谱填料均为球形。例如,色谱柱采用金属杂质<10ppm的高纯度球形硅胶。具有柱效高、峰形好等特点,可用于极性和碱性有机化合物的分离。
3. 颗粒表面积
相对而言,高表面积对样品具有更强的保留能力,更大的柱容量和分辨率。低表面积可以更快达到平衡,更适合梯度洗脱程序。
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