亲和层析原理及应用介绍
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- 发布时间：2022-07-28 11:09
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亲和层析是一种特殊的色谱技术，利用待分离物质与其特定配体之间的特定亲和力来达到分离目的。
亲和层析原理及应用介绍
亲和层析是一种特殊的色谱技术，利用待分离物质与其特定配体之间的特定亲和力来达到分离目的。
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亲和层析是一种特殊的色谱技术，利用待分离物质与其特定配体之间的特定亲和力来达到分离目的。
具有专一亲和力的生物分子对主要包括:抗原与抗体、DNA与互补DNA或RNA、酶及其底物或竞争性抑制剂、激素(或药物)及其受体、维生素及其特异性结合蛋白、糖蛋白及其相应的植物凝集素等。一对亲和分子中的一个通过共价键与不溶性载体相连，作为固定相吸附剂。当含有混合组分的样品通过这种固定相时，只有与固定相分子有特定亲和力的物质才能被固定相吸附结合，其他没有亲和力的无关组分随流动相流出。然后，移动组分被改变以洗脱结合的亲和力。亲和层析中使用的载体称为基质，与基质共价连接的化合物称为配体。
亲和层析的纯化过程简单、快速、分离效率高。对于分离含量少的不稳定活性物质特别有效。然而，这种方法必须制备特定的配体，并为某一分离对象寻求色谱的稳定条件。
利用亲和层析法可以简单、快速、高效地从混合蛋白溶液中分离纯化目的蛋白。亲和层析技术已经成为广泛应用的蛋白质分离技术，或者可以为客户提供的抗体或抗血清制备亲和层析柱。
亲和层析可用于:1、生物大分子的纯化;2、稀释溶液的浓度;3、不稳定蛋白质的储存;4、从纯化的分子中除去残留的污染物;5、免疫吸附法吸附和纯化无互补配体的生物大分子:6、分离核酸是亲和层析应用的一个重要方面。
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